訂購電話:4001650900

DNA病毒基因組提取試劑盒

英文名稱:
分子式:
分子量:
別名:
產品訂購:
品名 規格 包裝 單價 貨期
DNA病毒基因組提取試劑盒 50T 詢價 現貨
DNA病毒基因組提取試劑盒 100T 詢價 現貨
性狀:
試劑盒內容:   50T     100T
蛋白酶K        1ml     1ml×2
結合液         25ml    50ml
漂洗液         15ml    15ml×2
洗脫液         10ml    20ml 
吸附柱         50個    100個
收集管         50個    100個
說明書         1份     1份
質量標準:
產品簡介:

本試劑盒適合于從血清、細胞上清、淋巴液中提取DNA病毒基因組,不適合于RNA病毒基因組的提取。使用本試劑盒提取的基因組DNA可用于各種常規操作,包括酶切、PCR、文庫構建、Southern雜交等實驗。

操作步驟:

    使用前請先在漂洗液中加入無水乙醇,加入體積請參照瓶上的標簽。所有離心步驟均為使用臺式離心機在室溫下離心。

1、  取病毒上清液0.5ml,12000rpm離心5min,盡量吸盡上清使用,棄去沉淀。

2、  向病毒上清中加入20ul的蛋白酶K(10mg/ml),充分混勻,65℃消化10-20min,期間可顛倒離心管混勻數次。

3、  向管中加入500ul結合液,充分混勻。再向管中加入400ul無水乙醇,充分混勻,此時可能會出現絮狀沉淀,不影響DNA的提取,可將溶液和絮狀沉淀都加入吸附柱中,靜置2min。(吸附柱的最大容積為750ul,可分兩次加入。一次吸附完離心后再將余下的混合液體加入柱中靜置離心。)

4、  12000rpm離心2min,棄廢液,將吸附柱放入收集管中。

5、  向吸附柱中加入600ul漂洗液(使用前請先檢查是否已加入無水乙醇),12000rpm離心1min,棄廢液,將吸附柱放入收集管中。

6、  向吸附柱中加入600ul漂洗液,12000rpm離心1min,棄廢液,將吸附柱放入收集管中。

7、  12000rpm離心2min,將吸附柱置于室溫或50℃溫箱放置數分鐘,目的是將吸附柱中殘余的漂洗液去除,     否則漂洗液中的乙醇會影響后續的實驗如酶切、PCR等。

8、將吸附柱放入一個干凈的離心管中,向吸附膜中央懸空滴加50ul-100ul經65℃水浴預熱的洗脫液,室溫放置5min,12000rpm離心1min。

9、離心所得洗脫液再加入吸附柱中,室溫放置2min,12000rpm離心2min,即可得到高質量的病毒基因組DNA。

注意事項:

1、蛋白酶K需放置-20℃保存。

2、樣品應避免反復凍融,否則會導致提取的DNA片段較小且提取量也下降。

3、若結合液中有沉淀,可在37℃水浴中重新溶解再使用,不影響效果。

4、洗脫緩沖液的體積最好不少于50ul,體積過小會影響回收效率。洗脫液的pH值對洗脫效率也有影響,若需要用水做洗脫液應保證其pH值在8.0左右(可用NaOH將水的pH值調至此范圍),pH 值低于7.0會降低洗脫效率。DNA產物應保存在-20℃,以防DNA降解。

5、DNA濃度及純度檢測:得到的基因組DNA片段的大小與病毒的保存條件和種類等因素有關。D260值為1.0相當于大約50 ug/ml雙鏈DNA、40 ug/ml單鏈DNA。OD260/OD280比值應為1.7-1.9,如果洗脫時不使用洗脫緩沖液,而使用去離子水,比值會偏低,因為pH值和離子存在會影響光吸收值,但并不表示純度低。

6、如果病毒含量過低,最后提取的基因組DNA電泳可能無法檢測到,但PCR等其他實驗還會有結果。

貯存:
室溫(15℃-25℃) 干燥保存,復檢期12個月,2℃-8℃保存時間更長。
上海紫一試劑廠   ? 2024 All Rights Reserved      備案號:滬ICP備19037119號-1     
網站地圖:
試劑CAS試劑分類試劑產品實驗儀器耗材分類實驗儀器耗材新聞資訊
   滬公網安備 31012002003055號  
欧美久久一区二区_欧美XXXX做受欧美88HD_韩国午夜理伦三级在线观看_3751色一区二区三区